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V Method Nested End-Point PCR I Assays Code 25 PCR.Botr-25Liq 100 PCR.Botr-100Liq VIRUSES GRAPEVINE KITS Pathogen ArMV, GFLV Arabis mosaic virus Grapevine fanleaf virus Method Assays Triplex End-Point PCR 25 PCR.wrt.CN-25Liq (reverse transcriptase not included) with IC 100 PCR.wrt.CN-100Liq Triplex End-Point PCR 25 PCR.CN-25Liq (reverse transcriptase included) with IC 100 PCR.CN-100Liq 3 Code Qualiplante catalogue - Molecular phytodiagnostic all-inclusive kits GRAPEVINE KITS VIRUSES Pathogen ArMV, GFLV, GFkV, GLRaV-1, V-2, V-3, GVA Arabis mosaic virus, Grapevine fanleaf virus, Grapevine fleck virus, Grapevine leafroll-associated virus -1, -2 and -3, Grapevine virus A GFkV Grapevine fleck virus GFLV Grapevine fanleaf virus GLRaV-1, V-2, V-3 Grapevine leafroll-associated virus -1, -2 and -3 GLRaV-1 Grapevine leafroll-associated virus -1 GLRaV-3 Grapevine leafroll-associated virus -3 GRBaV Red Blotch-associated virus GVA Grapevine virus A GVB Grapevine virus B Method Assays Multiplex End-Point PCR 25 PCR.wrt.7VV-25Liq (reverse transcriptase not included) with IC 100 PCR.wrt.7VV-100Liq Multiplex End-Point PCR 25 PCR.7VV-25Liq (reverse transcriptase included) with IC 100 PCR.7VV-100Liq One-Step Real-Time ® RT-PCR (Taq-Man )* Code 25 qPCR.GFkV-25Liq 100 qPCR.GFkV-100Liq One-Step Real-Time ® RT-PCR (Taq-Man )* 25 qPCR.GFLV-25Liq 100 qPCR.GFLV-100Liq Triplex End-Point PCR 25 PCR.wrt.V123-25Liq (reverse transcriptase not included) with IC 100 PCR.wrt.V123-100Liq Triplex End-Point PCR 25 PCR.V123-25Liq (reverse transcriptase included) with IC 100 PCR.V123-100Liq One-Step Real-Time ® RT-PCR (Taq-Man )* Real-Time PCR (SYBR-Green) One-Step Real-Time ® RT-PCR (Taq-Man )* Real-Time PCR (SYBR-Green) End-Point PCR One-Step Real-Time ® RT-PCR (Taq-Man )* One-Step Real-Time ® RT-PCR (Taq-Man )* GRAPEVINE KITS * Please contact us for the fluorochromes comptatibility / IC:

Inhibition de la transcriptase inverse du HIV (dans LTCD4 ):

    o La  transcriptase  réverse  permet  de  passer  de  l'ARN  à  cDNA!

transcription inverse I-INTRO-HISTOIRE Les rétrovirus ont une enzyme qu'on appelle la transcriptase reverse(ou inverse),elle prend l ‘ARN simple brin et elle va recopier sur cet ARN simple brin un ADN simple brin.

Rétrotranscription de l’ARN viral en ADN proviral par la transcriptase inverse 3.

Deux  articles  importants  parurent  dans  "  Nature  "  en  1970,  signés  par  Temin  et  par  Baltimore.  Ils annonçaient la découverte d’une activité enzymatique jusqu’alors inconnue, la transcriptase inverse, dans des échantillons soi­disant purifiés de rétrovirus isolés à partir d’animaux de laboratoire. Cette enzyme fut très rapidement considérée comme un " marqueur " spécifique, indiquant la présence de rétrovirus. On n’allait donc plus rechercher les particules de rétrovirus, l’effort se portant désormais sur  l’identification  de  marqueurs  moléculaires.  Cette  nouvelle  approche  était  accueillie  avec enthousiasme  en  1970,  époque  à  laquelle  la  biologie  moléculaire  prenait  une  position  tout  à  fait dominante  en  sciences  médicales.  Nous  reviendrons  cette  après­midi  sur  ce  qu’il  faut  penser  de  la http://www.sidasante.com/edh/edh70s.htm 1/5 24/11/2014 La tragédie des annèes 70 spécificité de ce marqueur enzymatique. Pour l’instant, tout ce que je voudrais vous mettre à l’esprit c’est  que  la  découverte  de  cette  enzyme  avait  vigoureusement  remis  en  selle  les  rétrovirus  en recherche cancérologique, et ce à partir de 1970.

1-Reconnaissance du récepteur CD4 du LcT CD4 2-endocytose 3-ARN génomique est rétro-trancris en ADN proviral, la transcriptase inverse est associée à l'ARN.

Les rétrovirus sont des virus à ARN capables de « transcrire à l’envers » leur ARN en ADN grâce à une enzyme très particulière qu’ils possèdent, la transcriptase inverse.

TERT, telomerase enzyme reverse transcriptase.

Faux Les retrovirus ont leur transcriptase inverse dans la particule virale Vrai 4.

Seulement L1 (=LINE 1) qui n'est pas réduite au silence Famille Alu Par rétrotransposition (elles codent pour une reverse transcriptase) Incapable de rétrotransposer seul , ils rétrotransposent grâce à la trancriptase inverse des LINE Moyen utilisé par ces séquences pour se déplacer :

2 anti transcriptase inverse 1 anti protéase Oro-fécal Ø Ø Parentérale Sexuelle Accouchement Ø Parentérale Sexuelle Accouchement Gouttelettes Manu-portage Sécrétions respiratoires Gouttelettes Salive Sécrétions respiratoires Manu-portage Voie respiratoire Transplacentaire Oncogénique Ø Tératogène Non Ø Ø Oui avant 24S.

détection très sensible capable de mesurer des déflexions verticales de l’ordre du picomètre Diode laser Photodiode à quadrant Pointe AFM Echantillon Kuznetsov et coll, J Virol 2003 13 14 13 Structure des virus  Observation de virus non enveloppés  Paramecium bursaria chlorella virus type 1 (PBCV-1) 190 nm Faible grossissement Fort grossissement L’aspect des virus  Satellite tobacco mosaic virus (STMV) 17 à 18 nm 15 16 Virus « enveloppé enveloppés » Les virus « nus » Virus de la rage Adé Adénovirus Virus de la grippe Complexe transcriptase-réplicase Enterovirus:

La télomérase appartient à une classe d’ADN polymérase nommé transcriptase inverse et permet de compenser le déficit dut à la réplication.

la particule virale contient une transcriptase Cycle viral la replication est nucléaire Le virus se fixe par ses protéines à des protéines de la membrane cellulaire.

b – Avec ce montage, on obtient un potentiel d'action diphasique B – BIOLOGIE MOLECULAIRE 1°) a –Le phénomène X est la duplication de l'ADN - Le phénomène Y est la transcription b– Phénomènes X Duplication Y Transcription 2°) Localisation Noyau Noyau Enzymes responsables ADN polymérase ARN transcriptase Molécules obtenues Structure des molécules obtenues ADN 2 chaînes ARNm 1 chaîne a– Si le brin I représente le brin codant une chaîne polypeptidique, la séquence des bases de l’ARNm.

Me certifier de façon sans équivoque et de bonne foi, dans le respect de l’article 13 de la Convention d’Oviedo3, que cette technologie n’a pas le potentiel de modifier l’ADN humain grâce à ce que l’on appelle la transcriptase inverse, qui permet explicitement le transfert d’informations de l’ARNm à l’ADN ;

-TTT= traitement -R= résistance -ATV= antiviral -ARV= antirétroviral -RT, Rétrotranscriptase = TI, Transcriptase inverse Concernant les modalités de l'examen pour l'UE:

 de couper l’ADN de manière définie et reproductible, à l’aide d’enzymes de restriction,  d’intégrer l’ADN dans des vecteurs, molécule d’ADN utilisée comme outil de Cellule hôte ADN transfert (véhicule) de matériel génétique dans une cellule hôte (ou un organisme hôte),  de transcrire in vitro un ARNm en séquence d’ADN complémentaire (ADNc) Proté Protéine recombinante à l’aide de le Transcriptase inverse, (ex :

La transcription se déroule dans le noyau et est possible grâce à un enzyme catalyseur, appelé la transcriptase, ou, enzyme d’ARN polymérase.

 il est internalisé = endocyté  l’ARN se libère de sa coque et il est rétrotranscrit par une réverse transcriptase  ADN double brin  génome ADN (provirus) qui va s’intégrer dans le génome de la cellule ;

présence de l’enveloppe (bicouche lipidique avec glycoprotéines) •ARN ou ADN, une ou plusieurs molécules •Protéines à activité enzymatique (transcriptase inverse du VIH) •Capside entourant l’acide nucléique et les protéines enzymatiques, l’ensemble = nucléocapside b.

La technique utilisée est la RT-PCR (Reverse Transcriptase- Polymérase Chaine Réaction).

La polymérase de HBV présente une activité de transcriptase inverse lors du cycle de réplication E.

Transcriptase inverse VII – Les réparations.